困扰临床许久的三阴性乳腺癌患者化疗耐药，终于找到耐药“元凶”和作用机制。复旦大学附属肿瘤医院近日传出消息：该院大内科主任王红霞教授率领的课题组，在肿瘤微环境中首次鉴定出一种名为“TSPAN8+ myCAFs”的成纤维细胞耐药新亚群，与化疗失效密切相关。基于这一重大发现，团队开发了靶向TSPAN8-SIRT6信号的联合治疗策略，破解患者化疗耐药难题。相关成果刊登在国际顶尖学术期刊Science 子刊《Science Translational Medicine》，上海交通大学附属第一人民医院范广建等为该论文共同第一作者。
　　找到乳腺癌化疗耐药“元凶”
　　化疗药物在三阴性乳腺癌治疗中广泛应用，耐药性问题日趋严重，特别是一部分患者化疗后肿瘤快速进展，这一现象背后的分子机制尚不清楚。如何找到化疗耐药形成的机制，已成为临床医生和基础研究者面临的共同难题。复旦大学附属肿瘤医院大内科主任王红霞教授表示，她带领团队从探析肿瘤微环境的异质性出发。
　　在肿瘤微环境中，成纤维细胞是数量最多的一种细胞类型之一，它已被证实在调控肿瘤转移、血管生成和治疗方面起着关键作用。研究团队对新鲜切除的乳腺癌组织进行了高维流式单细胞分析，同时定量了50种蛋白质，覆盖了肿瘤微环境中的主要细胞亚群标记。通过无监督聚类分析，识别出一种独特的类衰老样成纤维细胞亚群，以四次跨膜蛋白tetraspanin-8（TSPAN8）高表达为特征。
　　课题组利用乳腺癌组织芯片和接受新辅助治疗患者的临床样本，发现TSPAN8+ myCAFs富集程度与乳腺癌患者耐药及复发进展显著相关。这一发现确认了TSPAN8+ myCAFs在乳腺癌化疗耐药性和不良预后中的重要作用，这就意味着长期困扰乳腺癌患者化疗的耐药“元凶”被找到。
　　探究耐药“伪装”作用机制
　　在研究过程中，为了解耐药“元凶”作用机制和相关性，以便为后续优化治疗策略找到方向，团队开展了人乳腺癌组织的TSPAN8+和TSPAN8-CAF比较对化疗药物的敏感性试验。结果显示，当用相同剂量的多西他赛和阿霉素治疗时，与TSPAN8-CAFs相比，TSPAN8+CAFs存活率显著提高，并通过一系列实验技术，证实这一细胞新亚群具有衰老的特征。
　　以往人们认为衰老细胞是一群即将死亡的细胞。生理过程中，细胞衰老被认为是一种复杂的应激反应和阻碍肿瘤发生的屏障。然而，基质成纤维细胞衰老与许多癌症类型的发病率增加有关，并影响基质与肿瘤细胞的相互作用。癌症上皮附近的区域优先富集衰老基质细胞。
　　尽管其机制尚不清楚，但CAFs的激活伴随着非增殖性的“衰老”状态和生长因子、促炎因子和降解酶的分泌增加，统称为衰老相关分泌表型。这种表型成纤维细胞可以促进癌症的生长和进展。
　　肿瘤细胞衰老的特点是失去增殖和生长能力，阻碍了肿瘤的进展。相反，CAFs的衰老更多地与它们的激活和功能转化有关，导致肿瘤微环境的变化和随后的影响，如调节因子的分泌。在这种情况下，细胞衰老是一种伪装，掩盖了高度静止的状态和增加的干性。
　　为进一步证实衰老特征与化疗耐药之间的关联性和作用机制，课题组采取衰老拮抗剂、衰老关键分子定向敲除等科学技术干扰后发现，这些“新亚群”细胞通过TSPAN8-SIRT6-MYC信号轴诱导衰老表型、采用衰老策略对抗化疗，并通过两方面策略协同肿瘤细胞对抗化疗：一是通过细胞因子IL-6和IL-8促进癌细胞干性，并有利于乳腺癌细胞在化疗造成的恶劣环境中存活；二是通过代谢重编程为肿瘤细胞提供天冬氨酸和脯氨酸营养成分，促进了存活下来的乳腺癌细胞增殖和进展。
　　破解耐药“元凶”治疗策略
　　王红霞团队近年来围绕tetraspanins家族成员在肿瘤发生发展中的调控开展系列性研究，前期研究揭示：TSPAN8通过激活Hedgehog信号增强乳腺癌细胞干性；肿瘤进展过程中EGF/EGFR信号通路激活通过SOX9上调TSPAN8转录，促进肝转移；四次跨膜蛋白TSPAN8响应胞外生长因子信号、入核调控下游基因表达的新型信号调控模式；自主研发靶向TSPAN8人源化治疗抗体和药物递送系统。
　　围绕TSPAN8-SIRT6信号轴在肿瘤干性壁龛及治疗抵抗调控中的关键作用，为进一步推动临床诊疗，研究团队利用噬菌体展示技术，从合成的人源scFv库中筛选出了针对TSPAN8-LEL的人源单克隆抗体hT8，结合之前工作中筛选出高选择性SIRT6激活剂MDL800，在细胞水平、类器官模型和小鼠模型中，证实TSPAN8抗体和MDL-800具有协同效应，可以逆转细胞衰老和化疗抗性。这一发现为临床逆转乳腺癌，尤其是三阴性乳腺癌的化疗耐药性提供了新的治疗策略。
（文章来源：周到）